研究中使用的所有動(dòng)物都是幼動(dòng)物或成年動(dòng)物，分別使用了雄性魚(yú)和雌性魚(yú)。測(cè)試容器包含一個(gè)中央的白色分隔器和一個(gè)紅色的卡片，用來(lái)區(qū)分兩部分。在分隔板的底部有足夠的空間，讓魚(yú)從魚(yú)缸的一邊游到另一邊。之所以使用彩色卡片，是因?yàn)榘唏R魚(yú)能夠看到并對(duì)紅色等顏色做出反應(yīng)。在行為研究開(kāi)始時(shí)，動(dòng)物的飲食限制至少24小時(shí)，基于大鼠和小鼠常用的交替任務(wù)（T迷宮），為斑馬魚(yú)設(shè)計(jì)了一個(gè)簡(jiǎn)單的空間交替范例。該范例來(lái)評(píng)估斑馬魚(yú)的空間學(xué)習(xí)和記憶功能。斑馬魚(yú)可以在短時(shí)間內(nèi)學(xué)習(xí)簡(jiǎn)單的空間交替范式，該任務(wù)可能有助于表征斑馬魚(yú)學(xué)習(xí)和記憶功能。

實(shí)驗(yàn)測(cè)試程序

試驗(yàn)開(kāi)始于在中央分隔器區(qū)域的水箱玻璃，然后在5秒內(nèi)展示食物。食物最初是在有紅色提示的水箱一側(cè)，然后在卡片對(duì)面的一側(cè)。在28次試驗(yàn)中，繼續(xù)交替呈現(xiàn)食物。每次只提供少量的食物，以避免動(dòng)物的飽足。一個(gè)正確的反應(yīng)被認(rèn)為是在試驗(yàn)期間，用來(lái)展示食物的水箱一側(cè)的動(dòng)物的身體存在。記錄所有三個(gè)時(shí)間點(diǎn)的觀察結(jié)果，對(duì)任務(wù)的學(xué)習(xí)有兩種決定方式。在這兩種情況下，動(dòng)物都是以隨機(jī)或接近隨機(jī)的機(jī)會(huì)或50%的正確選擇開(kāi)始的。動(dòng)物在空間交替任務(wù)和隨機(jī)食物展示中進(jìn)行測(cè)試。隨機(jī)進(jìn)行食物展示的動(dòng)物被給予相同的測(cè)試箱和提示，但動(dòng)物被給予預(yù)先設(shè)定的、計(jì)算機(jī)生成的和隨機(jī)順序的食物，而不是真正的交替方式。以這種方式記錄和分析所有時(shí)間點(diǎn)的反應(yīng)。如果正確的選擇百分比為75%，則判定斑馬魚(yú)為學(xué)習(xí)任務(wù)。訓(xùn)練動(dòng)物在食物展示時(shí)100%正確反應(yīng)，開(kāi)始斑馬魚(yú)的空間交替記憶測(cè)試。將斑馬魚(yú)從測(cè)試池中取出10天，然后隨意喂食。10天后，經(jīng)過(guò)訓(xùn)練的動(dòng)物被重新放入測(cè)試池，限制飲食24小時(shí)，并再次進(jìn)行交替執(zhí)行任務(wù)測(cè)試。記錄并分析了被實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在所有時(shí)間點(diǎn)的反應(yīng)。為了消除習(xí)得的行為，動(dòng)物被訓(xùn)練在展示食物展示時(shí)100%正確的選擇，然后在沒(méi)有食物獎(jiǎng)勵(lì)的情況下測(cè)試任何正確的反應(yīng)，記錄并分析所有的反應(yīng)。

圖一 標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)槽

所有實(shí)驗(yàn)均使用30×20×15厘米的水箱。屏障是白色層壓海報(bào)板，將水箱隔開(kāi)成兩半。屏障的深度約為水高的三分之二，允許在屏障周?chē)拖路胶叫?。水箱的一端貼有一張紅色海報(bào)板卡，作為視覺(jué)定位手段，并覆蓋水箱的一側(cè)。

圖二 斑馬魚(yú)（11只雄性，7只雌性）在空間交替任務(wù)中做出的正確選擇

將單個(gè)成年動(dòng)物放入所述的水箱中。在三個(gè)時(shí)間點(diǎn)（提示、食物和食物后5秒）觀察魚(yú)并記錄數(shù)據(jù)。

圖三 記憶測(cè)試和習(xí)得行為的消退

將單個(gè)幼年動(dòng)物（N = 6）放置在水箱中，并訓(xùn)練其在食物呈現(xiàn)時(shí)做出100%正確的選擇。

參考文獻(xiàn)

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